PCR耗材的选购技巧及考虑因素

PCR耗材为什么一般都是PP材质的呢，为什么需要环境洁净？
因为PCR/qPCR耗材通常会与试剂或样品直接接触，而聚丙烯（PP）材质是生物学惰性材料，表面不易于粘附生物分子，且有着良好的化学耐性，及温度耐受性（可以121℃ 高压灭菌，也可以承受热循环过程中的温度变化）。
这里强调一下耗材质量（是否干净）的重要性。PCR耗材必须保证没有污染物和抑制剂。高压和辐射能够去除细菌和DNA酶，但不能去除灰尘和DNA残留，它们可能会抑制PCR反应或产生非特异性扩增。物质是具有吸光度的，即便是很小的污染物也会吸收反应体系中的荧光，影响荧光信号的采集。因此，在生产这些塑料耗材时，从制模到最终的包装都必须在具有颗粒数量限制的设施环境中进行。

高热传递性
1）极薄的壁厚优化热传递减少循环时间。
之前买的PCR板/管材质厚度不一，是不是厚点的稳定性更好呢？
不是的，管壁厚度会直接影响热传导率，极薄的壁厚可优化热传递减少循环时间。要想提升PCR反应效率，保证反应稳定高效进行，均一、超壁薄的PCR耗材才是不二之选。

高反射荧光信号
1）qPCR更推荐使用优质的白色PCR耗材。
2）管盖：高透光性，盖子的光通过率直接关系着仪器的信号采集，选择一款透光性高的盖子对荧光定量检测极其重要。
不同颜色的PCR管/板，该怎么选呢？
对于普通的PCR反应选用透明或者彩色的PCR管都是可以的，而彩色透明的PCR管更有助于进行样品分类管理。但qPCR更推荐选用优质的白色PCR耗材。由于qPCR需要实时定量检测荧光信号强度，更需要灵敏、精确的荧光信号传递。实验证明，与传统的透明PCR产品相比，白色PCR产品可大程度地反射荧光信号，减少孔间信号交叉污染，可优化实时荧光定量PCR的结果。

高防污染性
1）盖子要紧密，盖子与管子的适配性要好，可以减少交叉污染。
2）PCR板要具有升孔缘，有利于密封。
3）一端有手持条，联排盖一端要有突出的手持端，开盖减少污染。为什么有的PCR板孔是凸出的，有的却是平的呢，哪个更好？适合的才是最好的。常见的PCR板有平孔缘和加高孔缘两种。平孔缘的反应板，可适用于大多数的PCR仪。升孔缘的反应板，便于封膜，可降低样品间的交叉污染风险。

高辨识性度
1）具有数字字母标识，有助于识别单个孔及样品位置。2）具有切角，便于辨认方向。对于96孔或者384孔板，为什么切角和标识都不是很相同呢？这是由切角和标识的作用决定的。
切角：PCR板的切角位置选择取决于适配仪器要求，便于定位。
标识：PCR板的数字字母标记有助于识别单个孔及样品位置。一般为凸出的颜色数字标识或者印刻标识。对于一些自动化应用实验，印刻标记的反应板密封性会更好。

体积精确
1）密封性：紧密的盖子，或者其他方式比如封膜减少蒸发。不同体积的PCR管/板，该怎么选呢？
选择宗旨：依据具体的实验要求选用合适的产品。PCR管的体积大多数都可以满足PCR反应的要求。在此基础上，推荐优先选用低容管。因为低容反应管/板有着较小的上方空间，可提高热传导率并降低蒸发。同时，在加样时需要避免加样过量或过少。过量会导致热传导率下降，溢出及交叉污染，而过少可能会造成样品蒸发损失。

常见反应管的规格及体积：
单管/8联管/12联管：0.5mL，0.2mL，0.15mL，0.1mL
96孔板：0.2mL，0.15mL，0.1mL
384孔板：0.04mL

易操作性
PCR耗材操作起来简单易行，如：盖子好盖但不影响密封性等。PCR耗材要与PCR仪器适配性好。
对于96孔或者384孔板，为什么有的有裙边，有的没有呢？
其实PCR/qPCR板的裙边是为了更好地适应自动化应用，可为仪器提供稳定的支持和机械耐受强度，且移液过程中的稳定性也会更高。PCR板一般分为无裙边、半裙边、全裙边。
无裙边板：可适用于大多数的PCR仪或qPCR仪，但不适用于自动化应用。移液过程中稳定性不高，需要配合板托使用。半裙边板：可适配标签或应用条码，及自动化应用，且有着较好的移液稳定性。全裙边板：非常适用于自动化实验应用，也可适配标签及应用条码。机械强度较好，可适用于凸出模块的PCR仪，且移液过程中稳定性高。
PCR封板膜有好多种类型，哪种实验效果更好呢？
根据具体的PCR实验要求选用适配的高质量封板膜，不仅能有效地保护样品，防止污染，还可以提供可信赖的实验检测数据。
提供温度耐受性和密封性强、高透明度、操作简便的高质量PCR/qPCR膜。

       文章来源：实验与分析

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