霍乱弧菌实验室检查方法有哪些？

7月9日晚，武昌区疾控中心接医院报告，武汉大学出现一例感染性腹泻病例，以呕吐腹泻为主，伴低热，血清学凝集试验为O139阳性。经省市区三级疾控中心复核， 该病例的血清学凝集试验为 O139 阳性，诊断为霍乱，毒力基因阴性。患者经有效诊治，病情已得到控制，症状已消失。我局已组织专业机构对相关人员进行采样检测和跟踪管理，对相关场所进行临时封控管理和消毒处置，目前未发现新增病例。霍乱被定为甲级传染病

霍乱与鼠疫一样，由于发病急、病情重、传染快、传播广泛、所以在我国被列为 法定甲级感染性疾病。如今在国内人尽皆知的新型冠状病毒肺炎，虽然按照甲类传染病采取措施，但仅被纳入了乙类传染病。霍乱是霍乱弧菌引起的一种具有传染性的急性腹泻疾病，病发高峰期在夏季，临床症状主要是腹泻和剧烈呕吐，大量米泔样排泄物、水电解质紊乱和周围循环衰竭，严重休克者可并发急性肾功能衰竭。通常潜伏期为1至3天，如果不及时治疗，患者可在数小时内就因为腹泻脱水而死亡。自1817年以来，曾经发生过七次世界性霍乱大流行，先后导致数千万人死亡，对部分染疫地区的民众生命健康、经济发展、社会稳定等方面造成了毁灭性打击。每年，全球大约有300万～500万人感染霍乱，死亡人数达10~12万。由于霍乱严重影响人民生活，生产等正常活动，因而 被世界卫生组织 (WHO) 规定为必须实施国际卫生检疫的三种传染病之一。近十多年来，我国霍乱疫情一直处于散发平稳状态，根据国家卫健委疾病预防控制局此前公布的数据，2021年，全国霍乱报告发病5例，无死亡病例；2020年全国霍乱报告发病11例，无死亡病例。由此大家虽然不能大意，但也不必过度恐慌。

为何要采取肛拭子检测？

因为新冠疫情，大家都对咽拭子和鼻拭子有了一定的了解，但此次霍乱检测采用的 肛拭子却并未接触过。肛拭子是在直肠采样进行检查的采样拭子，主要针对肠道内寄生虫或者细菌、病毒的检测，可用于诊断胃肠道传染病如细菌性痢疾，以及肛周疣、直肠淋病和HPV 感染等等。我国《霍乱诊断标准》指出，霍乱的实验室检测要求对患者的粪便、呕吐物或肛拭子经细菌培养分离，做霍乱弧菌快速辅助检测试验，作为综合诊断霍乱的依据之一。其实霍乱弧菌检测方式有很多，如以化学法检测粪便潜血需要采集前三天避免进食红肉、肝脏及菠菜、甘蓝、花椰菜等食物，以避免造成伪阳性结果。

因等待时间过长，限制过多，为尽早避免阳性产生的大范围传染情况，采用免疫法检测粪便潜血，一则不需要限制饮食种类，二则肛拭子检测用生理盐水浸湿采便管由肛门插入直肠内3~5cm处旋转取出即可，因此，肛拭子检测为最快最直观的检测方法。

霍乱弧菌实验室检查方法

01革兰染色

取粪便或早期培养物涂片作革兰染色镜检，可见革兰阴性稍弯曲的弧菌。

02悬滴镜检

将新鲜粪便作悬滴镜检，可见运动活泼呈穿梭状的弧菌。

03制动试验

取急性期患者水样粪便或碱性胨水增菌培养6小时表层生长物镜检，观察动力。
如有穿梭样运动物时，则加入O1群多价血清一滴，若是O1群霍乱弧菌，由于抗原抗体作用，则凝集成块，弧菌运动即停止。若加入O1群血清，不能制止运动，再用O139血清重作试验。

04分离培养

常用硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖（TCBS）、4号琼脂或庆大霉素琼脂平板。在TCBS上形成黄色菌落，4号琼脂或庆大霉素琼脂平板呈灰黑色中心的菌落均为可疑菌落。选择可疑菌落，应用O1群及O139群霍乱弧菌抗血清作玻片凝集试验。

05PCR

PCR产物中的霍乱弧菌toxR基因和毒素基因亚单位（CtxA）和毒素协同菌毛基因（TcpA）可用来区别霍乱菌株和非霍乱弧菌。

06质谱仪（MS）

MS可根据霍乱弧菌核糖体蛋白指纹图谱的特异性进行细菌鉴定。

07病原宏基因组新一代测序（mNGS）

mNGS可直接对样本中的核酸进行高通量测序，快速、客观的检测临床样本中的病原微生物，具有时效性强、灵敏度高等优势。

霍乱预防办法

1、饭前、便后和加工食物前要用流动的水和肥皂/洗手液洗手。

2、喝开水，不喝生水，不使用不洁的水漱口、刷牙、洗食具、洗水果、洗蔬菜和其他食品。

3、不吃生的食物，食品在吃前要煮熟、煮透。尽量少食用易带致病菌的食物，如螺蛳、贝壳、螃蟹等水海产品；吃剩饭菜要放在冰箱储存，不要吃未在冰箱储存或储存时间较长的食物，隔夜食物吃前一定要彻底加热，没条件储存、加热的请勿食用。

4、生吃瓜果蔬菜要洗净，先用清水浸泡，然后使用流水多次冲洗；一些带叶、带根的蔬菜，要特别注意根部的清洗。

5、尽量不要在路边摊或卫生条件差的餐馆进餐，在外就餐少吃凉拌菜和肉类烧烤食物。

6、尽量减少与腹泻病人的接触，特别是不要共用餐具。

       文章来源：实验与分析

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