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考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中（pH<1）与蛋白质结合后，颜色由棕红色变为蓝色，最大吸收峰从465nm转移至595nm，吸光度与蛋白质浓度在一定范围内呈正比。可检测微克级（μg）蛋白质，线性范围通常为0-1000μg/mL，超出范围需稀释样本。结合反应在2分钟内完成，显色复合物在室温下1小时内稳定，最佳检测时间为5-20分钟。通过严格遵循操作规范并规避干扰因素，考马斯亮蓝法可实现快速、经济的蛋白质精准定量，尤其适用于常规实验室的高通量筛查。
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