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要制作好的血涂片,可以按照以下步骤进行:
一、准备阶段
玻片清洗:将玻片放入肥皂或洗衣粉中煮沸20分钟,用热水将肥皂和血膜等污物洗去,再用自来水反复冲洗,最后用蒸馏水冲洗3次~5次。必要时再置95%酒精浸泡1小时,然后擦干或烘干备用。新玻片先置95%酒精浸泡或10%盐酸浸泡24小时,然后用水彻底清洗。
采血工具准备:使用75%酒精将无名指消毒,待酒精干后准备采血;或者准备好毛细吸管或塑料吸管,用于吸取EDTA抗凝的外周血。
二、采血与制片
采血:
-用消毒后的针刺破手指皮肤,使血液自然流出,切勿用力挤压。
-用毛细吸管或塑料吸管吸取EDTA抗凝的外周血4~6ul,或者直接采集患者末梢血,将血滴滴至载玻片的一端约3/4处。
制片:
-左手持载玻片,右手持推片,将推片接近血滴处,然后轻轻接触血滴并压在血滴上,使血液呈“~”字型或“一”字型展开,充满推片宽度。
-将推片与载玻片形成30°夹角(也可根据红细胞压积调整角度,如30°~45°),用均匀的速度将血向载玻片的另一端推动。
三、干燥与标记
-干燥:将推制好的血涂片迅速干燥,可以使用吹风机的冷风缓慢从侧面吹拂,或者让其自然风干。
-标记:在载玻片一端用记号笔编号或标注该标本的患者姓名或编码,便于后续识别。
四、染色与观察
-染色:使用适当的染色方法(如瑞氏染色法)对血涂片进行染色。先滴加染液覆盖血涂片,等待一段时间后,再滴加缓冲液混合染液,然后用流水冲洗干净。
-观察:将干燥后的血涂片置于显微镜下,先使用低倍镜观察血细胞形态,再根据需要逐次转换成高倍镜甚至油镜观察。
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