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酶相关免疫吸附测定 (ELISA) 通常用于测量生物样品中抗原、抗体、肽、蛋白质、激素或其他生物分子的存在和/或浓度。它极其敏感,能够检测低抗原浓度。ELISA 的敏感性归因于其检测单个抗原-抗体复合物 (1) 之间的相互作用的能力。此外,加入酶结合的抗原特异性抗体,可以将无色基质转化为色化或荧光产物,由板读取器检测并轻松定量。与已知感兴趣的抗原的定子量生成值相比,可以确定实验样品中相同抗原的浓度。不同的ELISA方案已经适应了测量各种实验样品中的抗原浓度,但它们都具有相同的基本概念(2)。选择 ELISA 的类型执行,间接,三明治,或竞争,取决于许多因素,包括要测试的样品的复杂性和可用的抗原特异性抗体。间接 ELISA 通常用于确定免疫反应的结果,例如测量样品中抗体的浓度。三明治ELISA最适合分析复杂样品,如组织培养上生或组织解液,其中分析物或感兴趣的抗原是混合样品的一部分。最后,当只有一种抗体可用于检测感兴趣的抗原时,竞争ELISA最常使用。竞争的 ELISA 也可用于检测只有单个抗体表位的小型抗原,该表位由于阻抗而无法容纳两种不同的抗体。该视频将描述间接、三明治和竞争性ELISA检测的基本程序。
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