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实验室液体培养基及抗性平板的准备
1. 液体培养基的配制
材料准备:胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、无菌水、抗生素(如氨苄青霉素)等。
配制步骤:
称量:按比例称取胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠(如每升培养基中10g胰蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠)。
溶解:将称好的成分加入适量蒸馏水中,搅拌至完全溶解。
灭菌:将溶液装入锥形瓶,用封口膜封口,121°C高压灭菌20-30分钟。
冷却:灭菌后冷却至室温,根据需要加入抗生素。
储存:拧紧瓶盖,室温或4°C保存备用。
2. 抗性平板的制备
材料准备:液体培养基、琼脂粉、抗生素(如氨苄青霉素)、培养皿等。
配制步骤:
溶解琼脂:在液体培养基中加入琼脂粉(如每升15g),加热至完全溶解。
灭菌:将含琼脂的培养基高压灭菌,冷却至55°C左右。
加抗生素:按比例加入抗生素(如氨苄青霉素至终浓度100μg/mL),轻轻摇匀。
倒平板:将培养基倒入无菌培养皿中,每皿约10-15mL,避免产生气泡。
凝固与储存:待培养基凝固后,倒置保存于4°C冰箱中,标记抗性和日期。
3. 注意事项
无菌操作:所有步骤需在无菌条件下进行,避免污染。
温度控制:加入抗生素时,培养基温度不宜过高,以免影响抗生素活性。
标记清晰:平板和培养基需明确标记抗性、日期等信息,便于后续使用。
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