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菌株的保藏和活化是微生物实验室中常见的操作,旨在确保菌株的稳定性和可用性。以下是菌株的保藏与活化方法:
一、菌株的保藏
1.斜面保藏法:将菌株接种到斜面培养基上,36-37℃培养24-48小时,待菌落长成后,将试管置于4℃冰箱中保藏。此方法适用于短期保藏和频繁使用的菌株。
2.液体石蜡保藏法:将菌株接种到肉汤培养基中,36-37℃培养24-48小时,然后在液体表面加一层石蜡油,以隔绝空气,抑制菌株生长。将培养好的试管置于4℃冰箱中保藏。此方法适用于长期保藏。
3.冷冻干燥保藏法:将菌株接种到适宜的培养基中,36-37℃培养24-48小时,然后将培养好的菌液置于冷冻干燥机中,抽真空冷冻干燥,待水分完全蒸发后,将菌粉置于冷冻干燥管中,密封后置于低温环境中保藏。此方法适用于长期保藏和运输。
二、菌株的活化
1.斜面活化:取保藏的斜面菌种,用接种环取少量菌落,接种到新鲜的斜面培养基上,36-37℃培养24-48小时,待菌落长成后,即可用于实验。
2.液体活化:取保藏的液体菌种,用吸管取少量菌液,接种到新鲜的肉汤培养基中,36-37℃振荡培养24-48小时,待菌液变浑浊后,即可用于实验。
3.冷冻干燥活化:取冷冻干燥的菌粉,用适宜的液体培养基溶解,36-37℃振荡培养24-48小时,待菌液变浑浊后,即可用于实验。
注意事项:
1.在进行菌株保藏和活化操作时,应严格遵守无菌操作规程,避免交叉污染。
2.选择合适的培养基和培养条件对于菌株的生长和活性至关重要。应根据菌株的种类和特性选择适宜的培养基和培养条件。
3.菌株在保藏过程中可能会发生变异,因此在使用前应进行必要的鉴定和纯化。
4.在进行菌株活化时,应注意观察菌株的生长情况,如发现异常,应分析原因,并采取相应措施进行处理。
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