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蛋白印迹——蛋白提取

蛋白印迹——蛋白提取。...

 

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蛋白印迹(Western Blot)实验中的蛋白提取是实验的关键步骤之一‌。

注意事项:

-低温操作‌:整个蛋白提取过程应在低温环境下进行,以防止蛋白降解。
-选择合适的裂解液‌:裂解液的选择应根据目标蛋白的特性以及实验需求进行综合考虑。例如,强RIPA裂解液适用于难以裂解的样本,如组织样本或需要提取膜蛋白和核蛋白的情况;弱RIPA裂解液适用于提取细胞中的全蛋白‌。
-加入蛋白酶和磷酸酶抑制剂‌:为了防止蛋白降解,需要在裂解液中加入蛋白酶抑制剂。对于需要检测磷酸化蛋白的Western Blot应用,还需在裂解液中加入磷酸酶抑制剂‌。
-离心条件‌:离心速度和时间的选择应根据样本类型和裂解液的性质进行调整,以确保获得清晰的蛋白上清液‌。

申明

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