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表面等离子共振技术(SPR)是一种基于光学物理现象的无标记实时检测技术,其核心原理在于金属薄膜(通常为金膜)表面自由电子与入射光之间的能量耦合效应。当特定波长和角度的偏振光在棱镜与金属薄膜界面发生全反射时,会在金属膜表面形成衰减的倏逝波,该电磁场能够激发金属表面自由电子产生集体振荡,形成表面等离子体波。当入射光角度或波长满足共振条件时,光能量被大量吸收导致反射光强度急剧下降,此时对应的入射角称为共振角。这一角度对金属表面介质的折射率变化极为敏感,当生物分子结合到金属膜表面的配体上时,会引起局部折射率变化,导致共振角发生偏移。通过实时监测共振角位移,可以精确量化分子间相互作用的动力学过程,包括结合速率常数(k_on)、解离速率常数(k_off)以及亲和力常数(K_D)。SPR技术的独特优势在于无需荧光或放射性标记即可实现高灵敏度检测,典型检测限可达pg/mm²级别,且能同时获取结合特异性、浓度依赖性和动力学参数等多元信息,使其成为研究蛋白质-蛋白质、核酸-蛋白质、小分子-靶标等相互作用机制的重要工具。
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